التقدير الكمي للفلافونويدات والدباغ والنشاطية المضادة للأكسدة لمستخلص ثمار نبتة التين الشوكي الأحمر (Opuntia ficus-indica) ومدى تأثيره على انحلال كريات الدم الحمراء

Abstract

يستخدم النوع Opuntia ficus-indica، المعروف باسم الصبار الشوكي الأحمر، على نطاق واسع في الطب العام والتقليدي بالإضافة إلى كونه مغذيًا بسبب غناه بالمركبات النشطة بيولوجيًا ومضادات الأكسدة. تهدف هذه الدراسة إلى حساب محتوى مركبين فينوليين، والنشاط المضاد للأكسدة، والتأثير الانحلالي، وطيف الامتصاص في الضوء المرئي و الفوق بنفسجي، للمستخلص الإيثانولي لثمار التين الشوكي الأحمر. كذلك فُصل المستخلص باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة لتحديد الجزيئات النشطة بيولوجيًا. أظهرت النتائج أن محتوى الماء في نبات Opuntia ficus-indica يُقدر بنسبة 80.85%، مقارنةً بنسبة 19.15% فقط من المادة الجافة. وبلغت المردودية 2.37% عند حسابه من الوزن الطازج الكلي للثمار، و12.35% من الوزن الجاف. وباستخدام طريقتي Bate-Smith وAlCl3 على التوالي، وجدنا أن المستخلصات تحتوي على كمية قليلة من الفلافونويدات، ولم تتجاوز 0.53 (ميكروغرام مكافئ/ملغ من المستخلص). لكن، كان متوسط محتوى التانينات أعلى، وقُدّر بـ 55.66 ميكروغرام مكافئ/ملغ من المستخلص. أما بالنسبة لاختبار انحلال خلايا الدم الحمراء، فقد أظهرت النتائج أن المستخلص الإيثانولي للفاكهة لم يكن له تأثير واضح في PBS وكان ضئيلاً للغاية. و على العكس، كان التأثير وقائيًا على خلايا الدم الحمراء عند استخدام تراكيز كلوريد الصوديوم، بين 0.2٪ و 0.4٪. عند تركيز كلوريد الصوديوم 0.6٪، كان التأثير انحلاليًا على النقيض من ذلك. أظهر اختبار مضادات الأكسدة DPPH أن المستخلص الإيثانولي كان له أعلى نشاط مضاد للأكسدة، بنسبة تثبيط 90.93٪ عند 1.6 ملغم / مل. تم تقدير IC50 عند 530 ميكروغرام/مل مقارنةً بـ .BHT باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) ، احتوى المستخلص على العديد من المركبات منها صبغتين رئيسيتين ، بيتاسيانين وبيتاكزانثين، والتي لها خصائص مضادة للأكسدة. بالإضافة إلى ذلك، يحتوي مستخلص Opuntia ficus-indica على معاول امتصاص في الأشعة فوق البنفسجية والضوء المرئي. كانت هذه المعاول متطابقة تقريبًا في الجودة والكمية قبل وبعد الاستخلاص. تمت مناقشة أهمية هذه النتائج في القسم المقابل. الكلمات المفتاحية: Opuntia ficus-indica ، المحتوى الإيثانولي، المردودية، الفلافونويدات، الدباغ، انحلال الدم، خلايا الدم الحمراء، DPPH، طيف الامتصاص، ============================================================================================================================L'espèce Opuntia ficus-indica, communément appelée figue de Barbarie rouge, est largement utilisée en médecine conventionnelle et traditionnelle ainsi que comme nutriment en raison de sa richesse en composés bioactifs et antioxydants. L'objectif de cette étude est d'évaluer la teneur en deux composés phénoliques, l'activité antioxydante, l'effet hémolytique et le spectre d'absorption en lumière visible et UV de l'extrait éthanolique d'Opuntia ficus-indica. De plus, l'extrait a été séparé par chromatographie sur couche mince afin d'identifier les molécules bioactives potentielles. Les résultats ont montré que la teneur en eau d'Opuntia ficus-indica est estimée à 80,85 %, contre seulement 19,15 % de matière sèche. Le rendement était de 2,37 % calculé à partir du poids frais total du fruit et de 12,35 % à partir du poids sec. En utilisant respectivement les méthodes de Bate-Smith et d'AlCl3, nous avons constaté que les extraits contenaient une faible quantité de flavonoïdes, ne dépassant pas 0,53 (µgEQ/mg Ext). La teneur moyenne en tanins était cependant plus élevée, estimée à 55,66 µgEAT/mg Ext. Concernant le test hémolytique des globules rouges, les résultats ont montré que l'extrait éthanolique du fruit n'avait pas d'effet clair en PBS et était presque négligeable. Cependant, l'effet était protecteur sur les globules rouges lorsque les concentrations de NaCl étaient comprises entre 0,2 % et 0,4 %. À une concentration de NaCl de 0,6 %, l'effet était hémolytique. Le test antioxydant de DPPH a révélé que l'extrait éthanolique avait l'activité antioxydante la plus élevée, avec un pourcentage d'inhibition de 90,93 % à 1.6 mg/ml. La CI50 a été estimée à 530 µg/ml par rapport au BHT. La chromatographie sur couche mince (CCM) a révélé que l'extrait contenait de nombreux tache, dont deux principaux pigments, les bétacyanines et les bétaxanthines, aux propriétés antioxydantes. De plus, l'extrait d'Opuntia ficus-indica présente des pics d'absorption en lumière UV et visible. Ces pics étaient presque identiques en qualité et en quantité avant et après extraction. L'importance de ces résultats est abordée dans la section correspondante. Mots clés : Opuntia ficus-indica, , teneur en eau, rendement, flavonoïdes, tannins, hémolyse, globules rouges, DPPH, spectre d'absorption, CCM.

=============================================================================================================================The species, Opuntia ficus-indica, commonly known as red prickly pear, is widely used in conventional and traditional medicine as well as a nutrient due to its richness in bioactive and antioxidant compounds The objective of this study is to evaluate the content of two phenolic compounds, the anti-oxidant activity, the hemolytic effect and the absorption specter in visible and UV light of the ethanolic extract of Opuntia ficus-indica. In addition the extract was separated using thin layer chromatography to identify potential bioactive molecules. The results have shown that the water content of Opuntia ficus-indica is estimated at 80.85 %, compared to only 19.15% of dry matter. The yield was 2.37% when calculated from the total fresh weight of the fruit and 12.35 from the dry weight. Using the Bate-Smith and AlCl3 method respectively, we found that the extracts contained a low quantity of flavonoids and did not exceed 0.53 (µgEQ/mg Ext). The average tannins content was however higher and was estimated at 55.66 μgEAT/mg Ext. As for the red blood cells hemolytic test, the results have shown that the ethanolic extract of the fruit did not have a clear effect in PBS and was almost negligible. However, the effect was protective on red blood cells when NaCl concentrations were used, between 0.2% and 0.4%. At 0.6% NaCl concentration the effect was in contrast hemolytic. The DPPH antioxidant assay have revealed that the ethanolic extract had the highest antioxidant activity, with an inhibition percentage of 90.93% at 40mg/ml. The IC50 was estimated at 530µg/ml compared to BHT. Using TLC, the extract contained many spots and two major pigments, betacyanins and betaxanthins, which have antioxidant properties. In addition, the extract of Opuntia ficus-indica, has absorption picks in UV and visible light. These picks were almost identic in quality and quantity before and after extraction. The Importance of these results are discussed in the corresponding section. Key words: Opuntia ficus-indica, , water content, yield, flavonoids, tannins, hemolysis, red blood cells, DPPH, absorption spectrum, TLC.