Effets des solutions tampons sur les propriétés adsorbantes d'une résine fonctionnalisée vis-à-vis de l’HSA et de l’IgG humaines

Abstract

Les médicaments dérivés du plasma représentent un secteur particulier du domaine pharmaceutique. Ils sont produits par fractionnement de la matière première, le plasma humain, qui permet d’isoler la protéine recherchée. Ces protéines hautement caractérisées sont indispensables à soigner des pathologies et sauver des vies. Le fractionnement plasmatique consiste à préparer ces produits thérapeutiques en s’appuyant sur des techniques fines et performantes aboutissant à un meilleur rendement tant sur le point quantitatif que qualitatif. Parmi ces techniques, nous avons tentés d’intégrer la méthode de la chromatographie d’affinité, IMAC. Un nouvel adsorbant fonctionnalisé chromatographique [N,N-s(salicylidenepropylenetriamine)-aminomethyl polystyrène] a été utilisé et qui peut fixer des différents métaux tels que le Cu(II). Le but de cette étude est de trouver les conditions les plus adéquates à l’adsorption et la désorption des protéines spécifique sur la résine. La pureté des éluant obtenus a été contrôlée par SDS-PAGE. Les résultats montrent que la résine-Cu(II) était capable de purifier une quantité d’HSA pure en utilisant le tampon d’élution (5 mM Tris-HCl, 10 mM imidazole, 10 mM MOPS et 35 mM NaCl) ainsi que le tampon (10 mM tampon phosphate, 35 mM NaCl et 5 mM imidzole). En plus, on a récupéré une quantité d’IgG pure à partir du plasma humain, en ajoutant une faible concentration de l’imidazole (5 ou 10 mM) au tampon d’élution (10 mM tampon phosphate et 5 mM MOPS). En conclusion, cette résine est une bonne matrice chelatrice de métaux bivalents et peut être utilisée pour la purification des IgG et des HSA du plasma humain à des fins diagnostiques et/ou thérapeutiques.