Probiotic bacteria from pollen : selection characterization and in vitro inhibition of helicobacter pylori

Abstract

Dans cette recherche, la qualité microbiologique d'échantillons de pollen a été étudiée. La MTAM variait de 3.00 à 5.80 Log UFC/g. Le NTML était entre 2.3 et environ 7 Log UFC/g. Cependant, Staphylococcus aureus a été récupéré à haute densité (jusqu'à 8.32 log UFC/g). Le Nombre d’entérobactéries varie de 3.00 à plus de 8 Log UFC / g. En outre, les échantillons analysés contiennent des membres pathogènes entérobactéries et les moisissures potentiellement toxinogènes, Ensuite, 567 isolats de bactéries lactiques ont été récupérés. Les Surnageants neutralisés des cultures de 54 bactéries lactiques (BAL) parmi 216 isolats actifs inhibent la croissance des bactéries indicatrices. Sur la base de la classification numérique, sept groupes avec deux autres membres ont été définis au niveau de la similitude de 79%. Le séquençage partiel du gène 16S ARNr des isolats représentatifs de chaque groupe, 10 souches ont été attribués à sept espèces: Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactococcus lactis, Lactobacillus ingluvies, Pediococcus pentosaceus, Lactobacillus piscis et Weissella cibaria. Après cela, 10 isolats de Lactobacillus sont identifiés par des méthodes phénotypiques et génotypiques. À pH 2, seulement deux souches (Lactobacillus sp. BH1398 et BH1480) qui ne pouvaient pas récupérer au bout de trois heures. Lb. plantarum, Lb. fermentum, Lb. acidophilus, et L. pentosus sont révélés être les souches les plus résistantes. Il semble que, 0.3% et 0.5% de sels biliaires n'affecte pas considérablement la survie de la plupart des souches, à l'exclusion de Lactobacillus sp. BH 1398. En Outre, toutes les souches étaient résistantes à la colistine, la clindamycine, le chloramphénicol et la ciprofloxacine, mais la plupart des souches étaient sensibles à la peniciline, oxacilline, l'oxytétracycline, et l'amoxicilline. Enfin, Lactobacillus fermentum BH1509 a été étudié pour son effet inhibiteur contre deux souches d'Helicobacter pylori. La souche BH1509 produit un petit bactériocine, désigné Bac-F15. Après purification partielle par précipitation au sulfate d'ammonium et Chromatographie sur Sephadex G-50, le poids moléculaire approximatif de Bac-F15 a été estimé par SDS-PAGE, entre 4100 et 6500 Da. Il présente un large spectre d’action. L'activité antibactérienne du surnageant de la culture bactérienne n'a pas été affectée par la catalase ou de la lipase, mais a été supprimée par les enzymes protéolytiques tel que la protéinase K, la trypsine et la pronase E. Bac-F15 était stable à la chaleur (10 min à 100°C) et il a montré une activité inhibitrice dans un large intervalle de pH (4.0 à 8.0). Il a une action bactéricide comme en témoigne son action sur les souches Helicobacter pylori. La bactériocine et son producteur, Lactobacillus fermentum BHB1509, peuvent être des agents antimicrobiens utiles pour lutter contre les infections gastro-intestinales causées par Helicobacter pylori.