Etude des propriétés anti-inflammatoires de la thymoquinone et de ses mécanismes d’inhibition des fonctions du neutrophile humain

Abstract

Les polymorpho nucléaires neutrophiles (PMN) jouent un rôle clé dans la défense anti infectieuse de l’hôte par l’intermédiaire de la production massive des formes réactives de l’oxygène (FRO) par la NADPH oxydase et la libération des protéines antibactériennes contenues dans les granules. Cependant, la libération inappropriée de ces molécules dans le milieu extracellulaire peut induire des dommages tissulaires sévères, contribuant ainsi à la physiopathologie de plusieurs maladies inflammatoires aigues et chroniques. Dans le présent travail, nous avons montré que la thymoquinone (TQ) inhibe fortement les fonctions du neutrophile humain induites par le fMLF, notamment la production des FRO (IC50 = 0,08 µg/ml) et la dégranulation. L’inhibition de la production des FRO n’est pas due à un effet scavenger, puisque la TQ n’inhibe pas la production d’anions superoxydes par le système xanthine/xanthine oxydase, ni à un effet cytotoxique sur les neutrophiles comme l’indique les tests de viabilité. De même, la TQ n’a montré aucun effet sur l’activité catalytique du complexe NADPH oxydase préassemblé, ni sur la translocation vers la membrane de ses composantes cytosoliques. De manière intéressante, la TQ inhibe la phosphorylation de la sous unité cytosolique p47PHOX de la NADPH oxydase sur les Sérines 304 et 328 induite par le fMLF. La TQ inhibe également la libération des granules spécifiques et azurophiles, comme en témoigne la diminution de l’expression à la surface cellulaire de la gp91PHOX, et du CD11b ainsi que de la libération extracellulaire de la MPO. Parallèlement, les voies des PKC et des MAPKs, connues pour être impliquées dans la phosphorylation de la p47PHOX et la dégranulation respectivement, sont toutes deux affectées par la TQ. Enfin, dans un modèle de pleurésie induite par la λ-carraghénine chez le rat, la TQ réduit l’accumulation des PMN dans la cavité pleurale, montrant ainsi que non seulement elle inhibe les fonctions des neutrophiles, mais possède également des propriétés antiinflammatoires in vivo. A cet égard, la TQ détiendrait un potentiel thérapeutique prometteur.